SMRT技術原理
單分子實時測序(Single Molecule, Real-Time, SMRT)建立在兩項關鍵的技術創新之上,克服了測序領域的重大挑戰。第一,零模波導孔(Zero-Mode Waveguides, ZMWs)技術隻允許激光照亮反應孔底部,也就是DNA聚合酶和模闆複合物固定的位置。第二,熒光基團标記在核苷酸的三磷酸末端,不僅可以模拟天然DNA鍊合成過程,而且可以實時記錄複合物上堿基摻入的順序。
單分子實時測序技術可以提供長讀長序列和均一覆蓋度的數據,完成迄今為止最為全面的基因組從頭(de novo)組裝。真正的全基因組測序應該為基因組中的有類型的變異提供完整且準确的信息,包括結構變異、可移動元件、單體型、低複雜度區域以及表觀遺傳學修飾。